人分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA檢測試劑盒操作說明！
 

　　產(chǎn)品名稱：人分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA檢測試劑盒
 

　　規(guī)格：96T
 

　　保存方法：2-8℃，避光防潮保存。
 

　　有效期：6個月
 

　　檢測原理：
 

　　試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人分泌型免疫球蛋白A(sIgA)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人分泌型免疫球蛋白A(sIgA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，計算樣品濃度。
 

　　操作步驟：
 

　　
 

　　1.  從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 

　　2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
 

　　3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；
 

　　4.  隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
 

　　5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
 

　　6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
 

　　7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
 

　　注意事項(xiàng)：
 

　　1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡60分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。
 

　　2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封(低溫干燥)保存。
 

　　3.  預(yù)處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。
 

　　4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
 

　　5.  所有液體組分使用前充分搖勻。
 

　　本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其它用途！現(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎廣大用戶前來咨詢！