基因組，Genome，一般的定義是單倍體細(xì)胞中的全套染色體為一個(gè)基因組，或是單倍體細(xì)胞中的全部基因?yàn)橐粋€(gè)基因組?，F(xiàn)dai遺傳學(xué)家認(rèn)為，基因是 DNA(脫氧核糖核酸)分子上具有遺傳效應(yīng)的特定核苷酸序列的總稱，是具有遺傳效應(yīng)的 DNA 分子片段?；蛭挥谌旧w上，并在染色體上呈線性排列?；虿粌H可以通過復(fù)制把遺傳信息傳遞給下一dai，還可以使遺傳信息得到表達(dá)。不同人種之間頭發(fā)、膚色、眼睛、鼻子等不同，是基因差異所致。

利用基因，人們可以改良果蔬品種，提高農(nóng)作物的品質(zhì)，更多的轉(zhuǎn)基因植物和動(dòng)物、食品將問世，人類可能在新世紀(jì)里培育出超級物作。

通過控制人體的生化特性，人類將能夠恢復(fù)或修復(fù)人體細(xì)胞和器官的功能，甚至改變?nèi)祟惖倪M(jìn)化過程。

產(chǎn)品特點(diǎn)

整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程不需要昂貴儀器，不需使用酚氯fang等有毒試劑，能夠得到高純度的大片段基因組 DNA，操作簡單，可同時(shí)處理多個(gè)樣品。

提取得到的基因組 DNA 可用于各種方向的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，如：文庫構(gòu)建、基因圖譜、Sunthern-Blotting、PCR 等。使用樣品細(xì)菌、酵母、血液、動(dòng)物組織、動(dòng)物細(xì)胞、植物組織、植物細(xì)胞等，使用新鮮樣品，或取樣后迅速將樣品密封，放于-20℃或-70℃保存，注意避免多次凍融樣品，否則將會(huì)導(dǎo)致所得基因組 DNA 的片段變小且提取質(zhì)量下降。

基因組 DNA 提取過程中注意事項(xiàng)：

1、因?yàn)?/span> DNA 的一級結(jié)構(gòu)是分子生物研究的基礎(chǔ)，所以應(yīng)盡量保證 DNA 的完整性。

2、盡量去除多余雜質(zhì)，如：蛋白、脂類、多糖、有機(jī)溶劑等的污染，以確保下游實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。

樣品的預(yù)處理方式

植物材料：液氮研磨

動(dòng)物材料：勻漿、液氮研磨

細(xì)菌：溶菌酶破壁

酵母：破壁酶，玻璃珠研磨

基因組提取常見問題

◆ 洗滌后硅膠膜上仍有雜質(zhì)殘留：

細(xì)胞裂解不充分, 裂解液和樣品要快速充分混勻。

◆ 柱子堵塞：

1.裂解或勻漿處理不*。減少樣品使用量，增加裂解液用量，增加勻漿和裂解時(shí)間。

2.處理樣品太多。

◆ 洗脫產(chǎn)物 DNA 量很少或沒有：

1.樣品中細(xì)胞或病毒濃度低。

2.裂解液和樣品混合不均勻造成的細(xì)胞裂解不充分。

3.蛋白酶 K 活性下降造成的細(xì)胞裂解不充分。

4.溫浴時(shí)間不夠造成的細(xì)胞裂解不充分或蛋白降解不*，盡量把組織切成小塊，延長溫浴時(shí)間，使裂解物中沒有顆粒狀物質(zhì)殘留。

5.在上柱前，裂解物中沒加乙醇，或用低濃度乙醇dai替無水乙醇。

6.DNA 沒有有效洗脫。提高洗脫效率，可將離心吸附柱加入洗脫液后在室溫靜置至少 1 min，再離心。

7.洗脫液 pH 不合適，低 pH 值會(huì)減少 DNA 產(chǎn)率。確保洗脫液 pH 值在 7.0－8.5 之間。

8.洗脫體積太大，超過 200μl 洗脫體積所得的 DNA 濃度會(huì)降低，但 DNA 總量不會(huì)減少。

• A260/A280 比值較低：

用水作為洗脫液時(shí)，比值偏低。

• A260/A280 比值較高：

大量 RNA 殘留，沒有使用 RNase A，或 RNase A 活性下降。

• DNA 影響后續(xù)酶反應(yīng)實(shí)驗(yàn)：

1.在洗脫液中有殘留的漂洗液 W1，可通過再次離心去除硅膠膜上的 W1。

2.大量 RNA 殘留。

◆ 緩沖液 A、B 中有白色沉淀：

白色沉淀可能由于低溫或長時(shí)間放置產(chǎn)生，可在使用前在 56℃重新加熱溶解。

◆ 操作中加入緩沖液 B 有白色沉淀：

緩沖液 B 加入后產(chǎn)生的白色沉淀在 70℃溫浴時(shí)會(huì)消失，不會(huì)影響下游操作。